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Industrie-optimierte NGS Oligos

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Oligonukleotide in höchster Qualität für den Einsatz in industriellen NGS-Anwendungen


Optimaler Syntheseprozess zur Minimierung des Risikos von Dateninterpretationsfehlern.

 

NGS Oligos in Tubes bestellen

Angebot für NGS Oligos in Platte erhalten

 

Einführung


Die Qualitätsanforderungen an NGS-Oligonukleotide sind zwangsläufig sehr hoch. Indexadapter-Oligonukleotide stechen jedoch besonders hervor, da sie höchste Qualitätsanforderungen erfüllen müssen.

Es ist wichtig, dass sie einen äußerst geringen Anteil an verkürzten Oligos aufweisen, und ein absolutes Minimum an anderen Adapterprimern enthalten, die im selben Sequenzierungslauf verwendet werden.

Eine solche Kreuzkontamination kann zu Fehlzuordnungen von Sequenzier-Reads zu anderen Proben führen. Folglich kann es zu Fehlern bei der Dateninterpretation kommen, beispielsweise wenn Ihr Experiment die Identifizierung seltener Genomvarianten umfasst.

Industrie-optimierte NGS Oligos

 

Um diesen Anforderungen gerecht zu werden, hat Eurofins Genomics ein neues Syntheseverfahren zur Herstellung hochwertiger NGS-Oligos entwickelt. Profitieren Sie von NGS-Oligos mit einer marktführenden Kreuzkontaminationsrate:

  • Typische Kreuzkontaminationsraten von nur 0,01-0,05%*
  • Hohe Flexibilität mit drei verschiedenen Mindestmengen: 4 nmol, 10 nmol & 25 nmol
  • Hochwertige ESI-MS-Analysen und Dokumentation
  • Oligos, die im Eurofins Genomics NGS-Labor verwendet werden
  • Verschiedene Anpassungsmöglichkeiten zur Erfüllung Ihrer besonderen Industrieanforderungen
 
 

>> FAQ's Oligos

>> FAQ's NGS

>> NGS Services

>> Anfrage senden

 

 

Weiterführende Informationen

 

 

Spezifikationen

Was Sie von unseren industrie-optimierten NGS Oligos erwarten können

 

  • Typische Kreuzkontaminationsrate von 0,01 - 0,05 %, bestätigt durch unser NGS-Labor (siehe Kreuzkontaminationsrate)
  • Verfügbare Mindestmengen von 4 nmol, 10 nmol und 25 nmol
  • DNA-Sequenzlänge von 15–120 Basen
  • Verfügbare Modifikationen sind PTO-Bindungen, 2’-Desoxyinosin, 2’-Desoxyuridin und 5’-Phosphat
  • Die Qualität wird durch OD-Messung und ESI-MS (Elektrospray-Ionisations-Massenspektrometrie) sichergestellt.
  • Ein Qualitätsbericht, einschließlich der ESI-MS-Spektren, wird kostenlos online bereitgestellt
  • Auswählbare Lösungsmittel sind bidestilliertes Wasser, TE-Puffer (10 mM Tris, 1 mM EDTA; pH = 8) oder Low EDTA Puffer (10 mM Tris, 0,1 mM EDTA, pH = 8).
  • Auf Anfrage sind verschiedene Anpassungsmöglichkeiten zur Erfüllung Ihrer Branchenanforderungen erhältlich:
    • Benutzerdefinierte Normalisierung
    • Mischungen und Pools
    • Überprüfung der Kreuzkontaminationsrate durch NGS
    • Produktion von Oligos > 120 Basen
    • Schnelle Lieferzeiten ab 8 Arbeitstagen

 

Zur Lieferung in Tubes:

  • Oligos werden in 2ml Tubes mit Schraubverschluss entweder lyophilisiert oder in flüssiger Form in der ausgewählten Konzentration geliefert
  • Oligo-Tube-Etiketten können mit persönlichen Kunden-Barcodes definiert werden

 

Zur Lieferung in Platten:

  • Oligos werden in der ausgewählten 96-Well-Platte in flüssiger Form in der definierten Konzentration geliefert
  • Es sind mindestens 12 Oligos pro 96-Well-Platte erforderlich

 

 

Kreuzkontaminationsrate

 

Die Kreuzkontaminationsrate von 0,01 bis 0,05 % wurde durch Sequenzierung repräsentativer Sets von Unique Dual Index (UDI)-Primer-Paaren unter Verwendung von Illumina-Instrumenten in der europäischen NGS-Sequenzierungsanlage von Eurofins Genomics bestimmt. Die angegebene Rate stellt den typischen Gesamtprozentsatz der Lese-Paare dar, die nicht den erwarteten UDI-Kombinationen für einen Satz von 96 UDI-Primer-Paaren entsprechen. Die entsprechende Anwendungsnotiz zeigt eine Kreuzkontaminationsrate von 0,0014 % für einen Satz von 14 UDI-Primer-Paaren.

 

Bitte beachten Sie, dass die Gesamtkreuzkontaminationsrate (Prozentsatz der falsch zugeordneten Lese-Paare) von der Gesamtanzahl der analysierten UDI-Primer-Paare parallel beeinflusst wird. Je mehr UDI-Primer analysiert werden, desto höher kann die Gesamtkreuzkontamination sein, da mehr unerwartete Indexkombinationen zugeordnet werden können.

 

In allen Fällen wäre die tatsächliche Kreuzkontamination der Primer sogar noch geringer, wie oben angegeben. Dies liegt daran, dass die Zuordnung von Lesevorgängen zu anderen unerwarteten UDI-Primer-Paaren eine Folge von Primer-Kreuzkontamination und Index-Hopping während der Sequenzierung ist. Eine Unterscheidung zwischen diesen Ursachen ist in diesem Analyse-Setup nicht möglich.

 

Bitte beachten Sie, dass Eurofins Genomics die Kreuzkontaminationsrate für jeden einzelnen Satz von produzierten und versandten NGS-Oligonukleotiden nicht bestimmt.

 

  Gesamte Kreuzkontaminationsrate
pro UDI-Satz 
(% Gesamtlesepaare, die nicht den erwarteten UDI-Kombinationen entsprechen)
Die niedrigste gemessene Kreuzkontamination pro UDI-Kombination Referenz
Eurofins Genomics NGSgrade Oligos Typisch 0.01 - 0.05% 0.00446% Set of 96 UDI Primer-Paaren
Eurofins Genomics NGSgrade Oligos 0.0014%
(siehe Application Note)
0.00045% Set of 14 UDI Primer-Paaren
Mitbewerber 0.0208%
(siehe Application Note)
0.00767% Set of 14 UDI Primer-Paaren

 

 

 

Reinheit - und Kopplungsrate

Produktdaten

Eurofins Genomics verwendet ein neues und proprietäres Synthesegerät zur Herstellung der hochqualitativen NGSgrade Oligonukleotide. Dieses Gerät ermöglicht eine unvergleichliche Kopplungseffizienz, und damit zu einem sehr hohen Prozentsatz an Vollängen-Oligonukleotiden.

Abbildung 1. Theoretische Reinheiten für NGSgrade Oligos. (A) Darstellung der theoretischen Reinheiten für Oligos unterschiedlicher Länge bei einer Kopplungsrate von 99,6 %. Diese durchschnittliche Kopplungsrate wurde auf der Grundlage einer großen und repräsentativen Stichprobe von Datenpunkten ermittelt. (B) Beispiel eines IP-RP-HPLC-Chromatogramms für einen UDI-Adapterprimer mit 72 Nukleotiden, aufgenommen bei λ = 260 nm. Für das Zielprodukt wurde eine Reinheit von 74,0 % gemessen. Die analytische IP-RP-UHPLC wurde mit einem Vanquish Horizon Duo-System von ThermoFisher Scientific durchgeführt.

 

 

Literatur

 

Oligonucleotide brochure

Application Note

 

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Exom-Sequenzierung von
Flüssig-Biopsie Proben


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Validiertes Krebs-Panel
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