Mycoplasmacheck - Mycoplasmacheck in jeder Zelllinie

Details zu unserem Mycoplasmacheck

Full-service package offered by Mycoplasmacheck:

• Nachweis aller im Europäischen Arzneibuch 2.6.7 aufgeführten Mykoplasmenarten: M. arginini, M. fermentans, M. orale, M. hyorhinis, M. hominis, M. genitalium, M. salivarium, M. synoviae, M. pirum, M. gallisepticum, M. pneumoniae, M. yeatsii, Spiroplasma citri and Acholeplasma laidlawii
• Identifizierung von mehr als 100 weiteren Mollikuten
• Hochempfindlicher Assay mit einer Nachweisgrenze von  1 internationale Einheit (IU) des WHO-Standards (WHO = Weltgesundheitsorganisation) pro PCR für Mykoplasmen-DNA (siehe Application Note)
• Hochspezifischer Test, der zehn Mykoplasmenexemplare pro Reaktion identifiziert – ohne Kreuzreaktivität mit E. coli oder eukaryotischer DNA
• Verwendung von Positiv- und Negativkontrollen zur Überwachung der Testleistung
• Exklusivlizenz vom Deutschen Krebsforschungszentrum (DKFZ) in Heidelberg
• Müheloser Versand mit den Sammelpunkten

Für Mycoplasmacheck verwendete Technologie

• Roche LightCycler 480 II

Gelieferte Ergebnisse bei Mycoplasmacheck

• Datenbericht mit Angabe zum Mykoplasmenstatus sowie zu eventuellen in der Probe gefundenen Inhibitoren der PCR
• Der Benutzer kann online jederzeit ein PDF-Dokument erstellen, um die Ergebnisse aus einem bestimmten Testzeitraum anzuzeigen.
• PDF-Dokument als unabhängiges Ergebniszertifikat; für die direkte Vorlage bei Verlagen oder Forschungsförderungseinrichtungen geeignet

Zuverlässige Detektion aller gängigen Mykoplasmenarten

Schätzungen gehen davon aus, dass 35 % aller Zelllinien weltweit mit Mykoplasmen kontaminiert sind.

Da die Anzeichen für eine solche Mykoplasmenkontamination leicht übersehen werden, kann nur die regelmäßige Überwachung der Zellkulturen gewährleisten, dass Forschungsergebnisse gültig und reproduzierbar sind. Dank standardisierter Arbeitsabläufe können bei uns alle gängigen Mykoplasmenarten schnell und zuverlässig erfasst werden.

Tabelle 1. Liste von häufig in Zellkulturen nachweisbaren Mykoplasmenarten. Diese Mykoplasmen, die allesamt im Europäischen Arzneibuch 2.6.7. aufgelistet werden, sind mit Mycoplasmacheck mühelos nachweisbar.

Als qPCR-basierter Assay ist die Technik präziser und empfindlicher als herkömmliche Mikrobenkulturmethoden und Biolumineszenz-basierte Methoden zum Nachweis von Mykoplasmen (Abb. 1). Neben einem deutlich reduzierten Personalaufwand in Verbindung mit hauseigenen Tests bietet die Auslagerung des Mykoplasmennachweises deutliche Vorteile, die mit Do-it-yourself-Kits nicht erreicht werden können (Abb. 2).

Abb. 1 Vergleich dreier unterschiedlicher Methoden für den Nachweis von Mykoplasmen in Zellkulturen Die Grafik zeigt die Überlegenheit der Mykoplasmen-PCR gegenüber kulturbasierten oder Biolumineszenz-basierten (Mycoalert) Techniken für die Untersuchung von Zelllinien auf Mykoplasmen (aus der Fachzeitschrift Cytotechnology (2014) 66: 861-873; bearbeitet)

Abb. 2 Vorteile der Verwendung von MYCOPLASMACHECK für den Mykoplasmennachweis durch PCR gegenüber betriebsintern angewandten PCR-Kits.

Hier finden Sie eine Auswahl von Publikationen unserer Kunden, die ihre Zelllinien auf eine Mycoplasma-Kontamination untersucht haben:

2022

Mycoplasmacheck: Gizon et. al., Generation of a heterozygous SCN5A knockout human induced pluripotent stem cell line by CRISPR/Cas9 edition

2021

Mycoplasmacheck: Kristiansson et. al., 177Lu-PSMA-617 Therapy in Mice, with or without the Antioxidant α1-Microglobulin (A1M), Including Kidney Damage Assessment Using 99mTc-MAG3 Imaging

Mycoplasmacheck: Goisnard et. al., The New Serum-Free OptiPASS® Medium in Cold and Oxygen-Free Conditions: An Innovative Conservation Method for the Preservation of MDA-MB-231 Triple Negative Breast Cancer Spheroids

Mycoplasmacheck: Sacchi et. al., Nanogold Functionalized With Lipoamide-isoDGR: A Simple, Robust and Versatile Nanosystem for αvβ3-Integrin Targeting 

Mycoplasmacheck: Malakpour-Permlid et. al., Identification of extracellular matrix proteins secreted by human dermal fibroblasts cultured in 3D electrospun scaffolds

Mycoplasmacheck: Groisnard et. al., LightSpot®-FL-1 Fluorescent Probe: An Innovative Tool for Cancer Drug Resistance Analysis by Direct Detection and Quantification of the P-glycoprotein (P-gp) on Monolayer Culture and Spheroid Triple Negative Breast Cancer Models

Mycoplasmacheck: Boehm et. al., SMG5-SMG7 authorize nonsense-mediated mRNA decay by enabling SMG6 endonucleolytic activity

Mycoplasmacheck: Perrin-Cocon et. al., A hexokinase isoenzyme switch in human liver cancer cells promotes lipogenesis and enhances innate immunity  

Mycoplasmacheck: Plavec et. al., Targeting of fluorescent Lactococcus lactis to colorectal cancer cells through surface display of tumour-antigen binding proteins

2020

Mycoplasmacheck: Janz et. al., Generation of two patient-derived iPSC lines from siblings (LIBUCi001-A and LIBUCi002-A) and a genetically modified iPSC line (JMUi001-A-1) to mimic dilated cardiomyopathy with ataxia (DCMA) caused by a homozygous DNAJC19 mutation 

Mycoplasmacheck: Nesteruk et. al., Forced expression of HOXA13 confers oncogenic hallmarks to esophageal keratinocytes

Mycoplasmacheck: Gretarsson et. al., Dppa2 and Dppa4 counteract de novo methylation to establish a permissive epigenome for development

Mycoplasmacheck: Tesauro et. al., Different Camptothecin Sensitivities in Subpopulations of Colon Cancer Cells Correlate with Expression of Different Phospho-Isoforms of Topoisomerase I with Different Activities

Mycoplasmacheck: Chua et. al., The NALCN channel complex is voltage sensitive and directly modulated by extracellular calcium

Vorausetzungen für den Test

Für eine maximale Sensitivität hier einige Vorschläge für die Zellkultur-Kultivierung vor dem Test:

• Zellinien sollten für eine Woche vor dem Versand ohne Mycoplasma-Antibiotika kultiviert werden. Penicillin und Streptomycin haben keinen Effekt auf Mycoplasmen und behindern den Test somit nicht.
• Zellkulturen sollten 3 Tage vor dem Test in demselben Medium aufbewahrt werden und auch nicht mit neuem Medium verdünnt werden.
• Cryo-aufbewahrte Zellkulturen sollten ungefähr 2 Wochen vor dem Test kultiviert werden.
• Adhärente Zellen sollten die Mediumflasche zu 80-90% bedecken. Bei einer noch dichteren Besiedelung könnten sich Inhibitoren ansammeln.

Probenvorbereitung

Versandadresse (ohne Dropbox):

Eurofins Genomics Europe Applied Genomics GmbH, Christian Dorn, Building 5,

Anzinger Str. 11, 85560 Ebersberg, Germany

Bitte senden Sie uns Ihre Proben ausschließlich wie unten beschrieben; das hilft uns dabei, Ihnen schnelle und präzise Ergebnisse zu liefern.

• Verwenden Sie 1,5ml „Safe Lock“-Tubes für Ihre Templates und Primer
• Verkleben oder umwickeln Sie Ihre Tubes nicht mit Parafilm. „Safe Lock“-Tubes sind viel besser geeignet, denn sie schließen perfekt ab und schützen vor Verdunstung.
• Etikettieren Sie Ihre Proben mit unseren Mycoplasmacheck Barcodes (Farbe Lila) - unten das Beispiel hat die falsche Etikettenfarbe). 
• Verwenden Sie wasserfesten Marker für alle zusätzlichen Kennzeichnungen auf Ihren Tubes

 (Barcode-Farbe falsch! Mycoplasmacheck Barcodes sind lila!)

Mycoplasmacheck Barcodes

Eine Übersicht über all Ihre Barcodes finden Sie im Barcode Management >>

Nachverfolgung der Bestellung

• Nach Probeneingang erhalten Sie von uns eine Email und sie finden die Bestellung in "Meine Bestellungen"
• Nach Abschluss der Bestellung erhalten sie eine "Partially Complete" oder "Complete" Email
  • Partially Complete = Ein Teil der Proben ist analysiert
  • Complete: Alle Proben sind analysiert
• Die Ergebnisse werden auf der Seite Mycoplasmacheck Ergebnisse zur Verfügung gestellt
  • Sie können ganz bequem einen Report für eine oder mehrere Proben generieren
  • Sie können Ihre Ergebnisse mit Ihren Kollegen teilen
  • Sie könne die Ergebnisse anhand des Resultats und des Datums filtern und sortieren