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Müheloses Outsourcing von Mykoplasmentests für alle Zelllinien

 


Mycoplasmacheck ist eine qPCR-basierte Dienstleistung zum Nachweis von Mykoplasmen in Zellkulturen.

 

>> Kostenloser test

>> Barcode Management

 


Prepaid MPC Barcode

Mycoplasmacheck Barcodes

  • Bestellen Sie die Barcodes im Vorraus
  • Wenn Sie Ihre Proben einschicken, muss keine Bestellung mehr platziert werden
 
 
 
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Möchten Sie unsere Dropboxen für den Probenversand verwenden?

Um unsere Dropboxen zu verwenden bestellen Sie bitte kostenfrei die Sticker unten. Bitte kleben Sie jeweils einen Sticker auf die Versandtüte/Box, die Sie in die Dropbox werfen.

Dieser Sticker ermöglicht eine schnelle Sortierung Ihrer Proben in unser Mycoplasma-Check (MPC) Testlabor und somit eine schnellere Lieferzeit.

Ihre nächste Dropbox finden Sie hier >>

Mehr Informationen zu unseren Dropboxen finden Sie hier >>

 


Stickers for your Tube Bags

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  • Eine Einheit beinhaltet 10 Versand-Sticker
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Wieso sollte ich meine Zelllinie auf eine Mycoplasma Kontamination testen?

 

Da eine Kontamination mit Mykoplasmen die Eigenschaften einer Zelllinie ändert, führt ein Nichtbemerken ihrer Präsenz oft zu nicht-reproduzierbaren Ergebnissen. Regelmäßige Tests mit Mycoplasmacheck dienen der raschen, genauen und objektiven Überprüfung von Zellen auf Mykoplasmenkontaminationen. So wird die Qualität der Zelllinien sichergestellt.

Besonderheiten des Mycoplasmacheck Service:

 

  • Standardisierter qPCR-Test auf Mykoplasmen, akkreditiert nach ISO17025
  • Verwendung interner Kontrollen garantiert hohe Spezifität und Sensitivität
  • Online-Datenlieferung innerhalb von 48 Stunden nach Probeneingang
  • Testprotokollbericht für ausgewählte Zeiträume oder Zelllinien kann jederzeit erstellt werden


 

>> FAQ's Mycoplasmacheck

>> Ergebnisse Mycoplasmacheck

 

 

 Produkt-Details & Probenvorbereitung und -versand

 

 

Produkt-Details

Details zu unserem Mycoplasmacheck

 

Full-service package offered by Mycoplasmacheck:

  • Nachweis aller im Europäischen Arzneibuch 2.6.7 aufgeführten Mykoplasmenarten: M. arginini, M. fermentans, M. orale, M. hyorhinis, M. hominis, M. genitalium, M. salivarium, M. synoviae, M. pirum, M. gallisepticum, M. pneumoniae, M. yeatsii, Spiroplasma citri and Acholeplasma laidlawii
  • Identifizierung von mehr als 100 weiteren Mollikuten
  • Hochempfindlicher Assay mit einer Nachweisgrenze von  1 internationale Einheit (IU) des WHO-Standards (WHO = Weltgesundheitsorganisation) pro PCR für Mykoplasmen-DNA (siehe Application Note)
  • Hochspezifischer Test, der zehn Mykoplasmenexemplare pro Reaktion identifiziert – ohne Kreuzreaktivität mit E. coli oder eukaryotischer DNA
  • Verwendung von Positiv- und Negativkontrollen zur Überwachung der Testleistung
  • Exklusivlizenz vom Deutschen Krebsforschungszentrum (DKFZ) in Heidelberg
  • Müheloser Versand mit den Sammelpunkten


Für Mycoplasmacheck verwendete Technologie

  • Roche LightCycler 480 II


Gelieferte Ergebnisse bei Mycoplasmacheck

  • Datenbericht mit Angabe zum Mykoplasmenstatus sowie zu eventuellen in der Probe gefundenen Inhibitoren der PCR
  • Der Benutzer kann online jederzeit ein PDF-Dokument erstellen, um die Ergebnisse aus einem bestimmten Testzeitraum anzuzeigen.
  • PDF-Dokument als unabhängiges Ergebniszertifikat; für die direkte Vorlage bei Verlagen oder Forschungsförderungseinrichtungen geeignet

 

Weitere Informationen

Zuverlässige Detektion aller gängigen Mykoplasmenarten

Schätzungen gehen davon aus, dass 35 % aller Zelllinien weltweit mit Mykoplasmen kontaminiert sind.

Da die Anzeichen für eine solche Mykoplasmenkontamination leicht übersehen werden, kann nur die regelmäßige Überwachung der Zellkulturen gewährleisten, dass Forschungsergebnisse gültig und reproduzierbar sind. Dank standardisierter Arbeitsabläufe können bei uns alle gängigen Mykoplasmenarten schnell und zuverlässig erfasst werden.

Tabelle 1. Liste von häufig in Zellkulturen nachweisbaren Mykoplasmenarten. Diese Mykoplasmen, die allesamt im Europäischen Arzneibuch 2.6.7. aufgelistet werden, sind mit Mycoplasmacheck mühelos nachweisbar.


Als qPCR-basierter Assay ist die Technik präziser und empfindlicher als herkömmliche Mikrobenkulturmethoden und Biolumineszenz-basierte Methoden zum Nachweis von Mykoplasmen (Abb. 1). Neben einem deutlich reduzierten Personalaufwand in Verbindung mit hauseigenen Tests bietet die Auslagerung des Mykoplasmennachweises deutliche Vorteile, die mit Do-it-yourself-Kits nicht erreicht werden können (Abb. 2).

 

Abb. 1 Vergleich dreier unterschiedlicher Methoden für den Nachweis von Mykoplasmen in Zellkulturen Die Grafik zeigt die Überlegenheit der Mykoplasmen-PCR gegenüber kulturbasierten oder Biolumineszenz-basierten (Mycoalert) Techniken für die Untersuchung von Zelllinien auf Mykoplasmen (aus der Fachzeitschrift Cytotechnology (2014) 66: 861-873; bearbeitet)

 

Abb. 2 Vorteile der Verwendung von MYCOPLASMACHECK für den Mykoplasmennachweis durch PCR gegenüber betriebsintern angewandten PCR-Kits.

 

 

Publikationen

Hier finden Sie eine Auswahl von Publikationen unserer Kunden, die ihre Zelllinien auf eine Mycoplasma-Kontamination untersucht haben:

 

2022

Mycoplasmacheck: Gizon et. al., Generation of a heterozygous SCN5A knockout human induced pluripotent stem cell line by CRISPR/Cas9 edition

 

2021

Mycoplasmacheck: Kristiansson et. al., 177Lu-PSMA-617 Therapy in Mice, with or without the Antioxidant α1-Microglobulin (A1M), Including Kidney Damage Assessment Using 99mTc-MAG3 Imaging

Mycoplasmacheck: Goisnard et. al., The New Serum-Free OptiPASS® Medium in Cold and Oxygen-Free Conditions: An Innovative Conservation Method for the Preservation of MDA-MB-231 Triple Negative Breast Cancer Spheroids

Mycoplasmacheck: Sacchi et. al., Nanogold Functionalized With Lipoamide-isoDGR: A Simple, Robust and Versatile Nanosystem for αvβ3-Integrin Targeting 

Mycoplasmacheck: Malakpour-Permlid et. al., Identification of extracellular matrix proteins secreted by human dermal fibroblasts cultured in 3D electrospun scaffolds

Mycoplasmacheck: Groisnard et. al., LightSpot®-FL-1 Fluorescent Probe: An Innovative Tool for Cancer Drug Resistance Analysis by Direct Detection and Quantification of the P-glycoprotein (P-gp) on Monolayer Culture and Spheroid Triple Negative Breast Cancer Models

Mycoplasmacheck: Boehm et. al., SMG5-SMG7 authorize nonsense-mediated mRNA decay by enabling SMG6 endonucleolytic activity

Mycoplasmacheck: Perrin-Cocon et. al., A hexokinase isoenzyme switch in human liver cancer cells promotes lipogenesis and enhances innate immunity  

Mycoplasmacheck: Plavec et. al., Targeting of fluorescent Lactococcus lactis to colorectal cancer cells through surface display of tumour-antigen binding proteins

 

2020

Mycoplasmacheck: Janz et. al., Generation of two patient-derived iPSC lines from siblings (LIBUCi001-A and LIBUCi002-A) and a genetically modified iPSC line (JMUi001-A-1) to mimic dilated cardiomyopathy with ataxia (DCMA) caused by a homozygous DNAJC19 mutation 

Mycoplasmacheck: Nesteruk et. al., Forced expression of HOXA13 confers oncogenic hallmarks to esophageal keratinocytes

Mycoplasmacheck: Gretarsson et. al., Dppa2 and Dppa4 counteract de novo methylation to establish a permissive epigenome for development

Mycoplasmacheck: Tesauro et. al., Different Camptothecin Sensitivities in Subpopulations of Colon Cancer Cells Correlate with Expression of Different Phospho-Isoforms of Topoisomerase I with Different Activities

Mycoplasmacheck: Chua et. al., The NALCN channel complex is voltage sensitive and directly modulated by extracellular calcium

 

 

Probenvorbereitung

Vorausetzungen für den Test

 

Für eine maximale Sensitivität hier einige Vorschläge für die Zellkultur-Kultivierung vor dem Test:

  • Zellinien sollten für eine Woche vor dem Versand ohne Mycoplasma-Antibiotika kultiviert werden. Penicillin und Streptomycin haben keinen Effekt auf Mycoplasmen und behindern den Test somit nicht.
  • Zellkulturen sollten 3 Tage vor dem Test in demselben Medium aufbewahrt werden und auch nicht mit neuem Medium verdünnt werden.
  • Cryo-aufbewahrte Zellkulturen sollten ungefähr 2 Wochen vor dem Test kultiviert werden.
  • Adhärente Zellen sollten die Mediumflasche zu 80-90% bedecken. Bei einer noch dichteren Besiedelung könnten sich Inhibitoren ansammeln.

 

Probenvorbereitung

 

Probenvorbereitung für Zellkulturen:

 

  • TÜberfpransfer 500 μl of cell culture supernatant from the test cell culture to a 1.5 ml tube. The lid should be sealed tightly to prevent opening during heating.
  • For suspension cell lines, stand culture flasks vertically allowing cells to settle for about 30 minutes prior to removal of 500μL of the supernatant and transfer to a 1.5 ml tube.
  • Boil supernatant at 95 °C for 10 minutes.
  • Briefly centrifuge (5 seconds) the sample at ~13,000 rpm to pellet cellular debris.
  • Transfer 100 – 200 μl of supernatant into a new 1.5 ml tube labelled with a MYCOPLASMACHECK barcode. Do not disturb pellet

Probenvorbereitung für Zellkulturen, die für PCR Inhibition anfällig sind:

 

For adhärente Zelllinien:

 

  • Überführen Sie 500ml des Zellkulturüberstandes in ein 1,5 ml Reaktionsgefäß (Tube).
  • Die Probe(n) 10min bei >10.000 x g zentrifugieren, um die Mycoplasmen zu pelletieren.
  • Entfernen Sie vorsichtig 450µl des Überstandes ohne das Pellet zu berühren.
  • Kochen Sie die verbleibenden 50µl bei 95 °C für 10 min. Der Deckel sollte gut verschlossen werden, so das er sich nicht durch das Erhitzen öffnet (Parafilm)
    opening during heating.
  • Führen Sie eine DNA Extraktion mit einer kommerziell erhältlichen DNA Extraktionskit durch.
  • Eluieren sie mit 30µl und verwenden sie ein Reaktionsgefäß mit dem Mycoplasmacheck Barcode darauf.

 

Für Suspensions-Zelllinien:

 

  • Zentrifugieren Sie 500µl der Probe für 3 min bei >300 x g um die eukaryotischen Zellen zu pelletieren.
  • Überführen sie den Überstand in ein neues 1,5 ml Reaktionsgefäß.
  • Fahren Sie dann ab Schritt 2 oben fort

 

 

Probenversand

Versandadresse (ohne Dropbox):

 

Eurofins Genomics Europe Applied Genomics GmbH, Christian Dorn, Building 5,

Anzinger Str. 11, 85560 Ebersberg, Germany

 


Bitte senden Sie uns Ihre Proben ausschließlich wie unten beschrieben; das hilft uns dabei, Ihnen schnelle und präzise Ergebnisse zu liefern.

 

  • Verwenden Sie 1,5ml „Safe Lock“-Tubes für Ihre Templates und Primer
  • Verkleben oder umwickeln Sie Ihre Tubes nicht mit Parafilm. „Safe Lock“-Tubes sind viel besser geeignet, denn sie schließen perfekt ab und schützen vor Verdunstung.
  • Etikettieren Sie Ihre Proben mit unseren Mycoplasmacheck Barcodes (Farbe Lila) - unten das Beispiel hat die falsche Etikettenfarbe). 
  • Verwenden Sie wasserfesten Marker für alle zusätzlichen Kennzeichnungen auf Ihren Tubes

 

 (Barcode-Farbe falsch! Mycoplasmacheck Barcodes sind lila!)

 

1

Only use 1.5 ml
safe-lock tubes

 

2

Remove barcode
stricker from film

 

3

Affix barcode sticker
horizontally

 

4

QR-code visible at front so
it can be read by scaner

 

 

Informationen zu Ihrer Bestellung

Mycoplasmacheck Barcodes

Eine Übersicht über all Ihre Barcodes finden Sie im Barcode Management >>

 

Nachverfolgung der Bestellung

  • Nach Probeneingang erhalten Sie von uns eine Email und sie finden die Bestellung in "Meine Bestellungen"
  • Nach Abschluss der Bestellung erhalten sie eine "Partially Complete" oder "Complete" Email
    • Partially Complete = Ein Teil der Proben ist analysiert
    • Complete: Alle Proben sind analysiert
  • Die Ergebnisse werden auf der Seite Mycoplasmacheck Ergebnisse zur Verfügung gestellt
    • Sie können ganz bequem einen Report für eine oder mehrere Proben generieren
    • Sie können Ihre Ergebnisse mit Ihren Kollegen teilen
    • Sie könne die Ergebnisse anhand des Resultats und des Datums filtern und sortieren

 

 Literatur

 

Mycoplasmacheck sample submission guide

Application note

Mycoplasma species detected

 

 

 

 

 

 

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